PCR潔凈實(shí)驗室
PCR實(shí)驗指的是基因擴增實(shí)驗,其特點(diǎn)是能將微量的DNA大幅增加,是分子生物學(xué)研究和實(shí)驗的常規方法,PCR實(shí)驗室廣泛應用于生物學(xué)各個(gè)領(lǐng)域,例如:乙型肝炎,禽疫病、艾滋病檢測,癌基因的檢測和診斷,個(gè)體識別,DNA指紋,親子鑒定及法醫物證等。
一、PCR實(shí)驗室布局
1、PCR實(shí)驗室原則上分為:①試劑準備區;②樣品制備區;③擴增區;④擴增產(chǎn)物分析區,共四個(gè)單獨的工作區域。并設有專(zhuān)用走廊,各工作區域應設緩沖間,工作區與緩沖間宜安裝連鎖裝置。
2、不同功能的工作區應是分隔獨立的,各工作區有明顯的標志,不能直通,如果緊密連接,需安裝物品傳遞窗。
二、實(shí)驗室各區功能及主要設備
1、試劑準備區:
① 主要進(jìn)行試劑的制備,分裝和主反應混合液的制備。試劑盒用于樣品制作的材料應直接運送至該區域。
② 試劑原材料必須貯存在本區內,并在本區內制備成所需的試劑。
③ 本區主要設備有冰箱,天平,離心機,加樣器,振蕩器等。
④ 本區對氣流壓力的控制,并沒(méi)有嚴格的要求,一般為+10Pa。
2、樣品制備區:
① 主要進(jìn)行樣品的保存,核酸提取,貯存及其加入至擴增反應管和測定DNA的合成。
② 本區主要設備有冰箱,生物安全柜,離心機,加樣器,振蕩器等。
③ 本區的壓力梯度要求為:相對于鄰近區域為正壓,以避免從鄰近區進(jìn)入本區的氣溶膠污染,壓力一般設計為+10Pa。
3、擴增區:
① 主要進(jìn)行DNA擴增項目。
② 已制備的DNA模板(來(lái)自樣品制備區)的加入和主反應混合液(來(lái)自試劑準備區)制備成反應混合液等也可在本區內進(jìn)行。
③ 本區主要設備有:冰箱,加樣器,離心機,擴增儀等。
④ 本區的壓力梯度要求為:相對于鄰近區域為負壓,以避免氣溶從本區漏出,壓力一般設計為-25Pa。
4、 擴增產(chǎn)物分析區:
① 主要進(jìn)行擴增產(chǎn)物的測定。
② 本區主要設備有加樣器,洗板機、酶標儀和水浴箱等。
③ 本區的壓力梯度的要求為:相對于鄰近區域為負壓,以避免擴增產(chǎn)物從本區擴散至其它區域,壓力一般設計為-25Pa。